圖1：TaqMan動作示意圖
Ct值計算及含義
由於 DNA 構成半保留複製，因此目標模板的反應被放大至 2 的 N 次方。病毒的每一次復制構成一個週期； “Ct值”是循環閾值的縮寫。當進行 qPCR 反應時，患者樣本中的目標核酸模板繼續以 2 的 2 次方的速率擴增（圖 2）。同時，用特異的TaqMan探針檢測病毒的特異基因片段。當核酸擴增超過設定的閾值/截止值時，可以進行檢測。此時的Ct值代表病毒已復制的次數。例如，當 Ct 值為 25 時，這意味著它已經經歷了 25 個循環，進而表明病毒在檢測之前已擴增了 2 的 25 次方。因此，當某天患者體內的病毒量較高時，需要進行的複制次數較少，Ct值也較低，反之亦然。
由於 DNA 構成半保留複製，因此目標模板的反應被放大至 2 的 N 次方。病毒的每一次復制構成一個週期； “Ct值”是循環閾值的縮寫。當進行 qPCR 反應時，患者樣本中的目標核酸模板繼續以 2 的 2 次方的速率擴增（圖 2）。同時，用特異的TaqMan探針檢測病毒的特異基因片段。當核酸擴增超過設定的閾值/截止值時，可以進行檢測。此時的Ct值代表病毒已復制的次數。例如，當 Ct 值為 25 時，這意味著它已經經歷了 25 個循環，進而表明病毒在檢測之前已擴增了 2 的 25 次方。因此，當某天患者體內的病毒量較高時，需要進行的複制次數較少，Ct值也較低，反之亦然。
圖2：Ct值計算圖（Ct=n；RFU=2n）
通常，qPCR 反應運行 40-45 個循環，但 Ct 值需要多少週期才能被視為陽性？ 它取決於試劑的檢測限 (LoD) 和閾值/截止值。
GB SARS-CoV-2 Real-Time RT-PCR kit（4PCO052E）的Ct閾值為37，檢測限（LoD）為1,000 copies/ml，代表患者體內病毒載量極低。該病毒需要擴增 2 的 37 次方（Ct = n，病毒拷貝數 = 2n）才能使用 GB SARS-CoV-2 反轉錄即時聚合酶鏈鎖反應試劑盒進行檢測。通過了解Ct值背後的原理，我們可以獲得更多信息，比如推測與疾病的嚴重程度、死亡率、傳染性等。大多數人可能直觀地認為患者的Ct值越低，病毒載量就越高； 而且症狀的嚴重程度和傳染性也相對較高。但實際上，這種現像在臨床上並不是絕對的。這是因為Ct值並不是一個絕對值，它會受到採樣方法、樣本類型、試劑質量、採樣時間等多種因素的影響。
Ct值當然是一個重要的依據； 在當前的 COVID-19 醫療決策中。但Ct值只是確診患者陽性時參考的指標之一。醫生仍會使用患者的症狀作為決策的主要依據。
除了參考試劑本身的檢測限外，隨著每日確診病例數的上升，世界各國政府也在放寬Ct值檢疫標準。與解除隔離相關的Ct值越高，則越嚴格；這種做法比較適合確診病例數量較少、需要防止病毒傳播的情況。但當感染人數過多、醫療資源消耗過多時，就必須考慮為重症患者保留足夠的醫療資源，平衡防疫及經濟活動。
GB SARS-CoV-2 Real-Time RT-PCR kit（4PCO052E）的Ct閾值為37，檢測限（LoD）為1,000 copies/ml，代表患者體內病毒載量極低。該病毒需要擴增 2 的 37 次方（Ct = n，病毒拷貝數 = 2n）才能使用 GB SARS-CoV-2 反轉錄即時聚合酶鏈鎖反應試劑盒進行檢測。通過了解Ct值背後的原理，我們可以獲得更多信息，比如推測與疾病的嚴重程度、死亡率、傳染性等。大多數人可能直觀地認為患者的Ct值越低，病毒載量就越高； 而且症狀的嚴重程度和傳染性也相對較高。但實際上，這種現像在臨床上並不是絕對的。這是因為Ct值並不是一個絕對值，它會受到採樣方法、樣本類型、試劑質量、採樣時間等多種因素的影響。
Ct值當然是一個重要的依據； 在當前的 COVID-19 醫療決策中。但Ct值只是確診患者陽性時參考的指標之一。醫生仍會使用患者的症狀作為決策的主要依據。
除了參考試劑本身的檢測限外，隨著每日確診病例數的上升，世界各國政府也在放寬Ct值檢疫標準。與解除隔離相關的Ct值越高，則越嚴格；這種做法比較適合確診病例數量較少、需要防止病毒傳播的情況。但當感染人數過多、醫療資源消耗過多時，就必須考慮為重症患者保留足夠的醫療資源，平衡防疫及經濟活動。
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